PCR Nedir?
PCR (Polymerase Chain Reaction - Polimeraz Zincir Reaksiyonu), DNA'nın belirli bir bölgesinin laboratuvar ortamında milyonlarca kez çoğaltılmasını sağlayan moleküler biyoloji tekniğidir.
1983'te Kary Mullis tarafından geliştirilmiş ve 1993 Nobel Kimya Ödülü'ne layık görülmüştür.
PCR Döngüsü
| Adım | Sıcaklık | Süre | İşlev |
|---|---|---|---|
| Denatürasyon | 94-98°C | 15-30 sn | DNA ipliklerinin ayrılması |
| Annealing | 50-65°C | 20-40 sn | Primerlerin bağlanması |
| Extension | 72°C | 30-120 sn | Yeni DNA zinciri sentezi |
Eksponansiyel Çoğalma: 30 döngü = ~1 milyar kopya
PCR Bileşenleri
| Bileşen | İşlev |
|---|---|
| Template DNA | Çoğaltılacak hedef DNA |
| Primerler | Hedef bölgeyi sınırlayan oligonükleotidler |
| dNTP'ler | DNA yapıtaşları (A, T, G, C) |
| DNA Polimeraz | DNA sentezleyen enzim (Taq) |
| MgCl₂ | Enzim kofaktörü |
| PCR Buffer | pH ve iyon ortamı |
PCR Türleri
| Tür | Açıklama | Kullanım |
|---|---|---|
| Konvansiyonel PCR | Klasik, jel elektroforezi | Genotipleme |
| RT-PCR | RNA'dan cDNA, sonra PCR | Virüs tespiti |
| qPCR (Real-time) | Gerçek zamanlı ölçüm | COVID-19, gen ekspresyonu |
| Multiplex PCR | Birden fazla hedef | Patojen panelleri |
| Nested PCR | İki aşamalı, yüksek spesifiklik | Düşük kopya tespiti |
| Digital PCR | Mutlak kantitasyon | Nadir mutasyonlar |
Size Uygun Eğitimi Bulun
Bireysel mi yoksa kurumsal mı eğitim arıyorsunuz?
Uygulama Alanları
- Tıbbi Tanı: COVID-19, HIV, tüberküloz, genetik hastalıklar
- Forensik: DNA parmak izi, babalık testi
- Araştırma: Gen klonlama, sekans analizi
- Gıda Güvenliği: GMO tespiti, patojen tespiti
- Tarım: Moleküler markör destekli seleksiyon
Kalite Kontrolleri
| Kontrol | Amaç |
|---|---|
| Pozitif Kontrol | PCR'ın çalıştığını doğrular |
| Negatif Kontrol (NTC) | Kontaminasyon kontrolü |
| Internal Kontrol | Numune kalitesi doğrulama |











